کلونینگ و بیان ژن فاکتور رشد اندوتلیال عروق از جدایه ای از ویروس orf از شهر اهواز

اکتیمای واگیر یک بیماری ویروسی جلدی و غیرسیستمیک است که به طورعمده گوسفند و بز را مبتلا می کند و به وسیله تماس مستقیم به انسان قابل انتقال می باشد. با مطالعه ی ژنوم ویروس عامل این بیماری، حضور ژنی مشابه با ژن vegf در آن نشان داده شده است. vegf و گیرنده های آن دارای نقش مهمی در روند رگ زایی می باشند. ژن vegf ویروس اورف (vegf-e) به عنوان یک عامل حدت ویروسی محسوب شده است، اما توالی آن در جدایه های مختلف ویروس متغییر است. هدف از مطالعه حاضر تعیین توالی، کلونینگ و بیان ژن vegf-e ویروس اورف در جدایه ای از شهر اهواز (ahvaz-1/ iran/ 2011) بود. در ابتدا جهت آگاهی از خصوصیات ژنتیکی ژن vegf-e ویروس اورف در این جدایه، توالی نوکلئوتیدی این ژن تعیین و مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور ناحیه کد کننده ژن vegf-e با آزمایش pcr تکثیر و تعیین توالی گردید. توالی نوکلئوتیدی ژن vegf-eدر جدایه مورد مطالعه در مقایسه با 10 توالی دیگر این ژن که از بانک ژن استخراج شدند، مورد بررسی و مطالعه فیلوژنتیک قرار گرفت. بر اساس توالی ژن vegf-e، جدایه -اهواز بیشترین (98%) و کم ترین (8/42%) شباهت را به ترتیب با جدایه های nz2/ newzland/ 2005 و nz7/ newzland/ 1994 داشت. سپس، ژن vegf-eجدایه ی ahvaz-1/ iran/ 2011 در وکتور بیانی- پروکاریوتی pmal-c2x در باکتری اشریشیا کلای سویه ی rosetta کلون گردید. بررسی بیان پروتئین نوترکیب mbp-vegfe با استفاده از روش sds- page نشانگر بیان موفق این پروتئین بود.